興安縣為實施國家財政部、科技部下達的“科技富民強縣專項行動——羅漢果產業開發與示范”項目,采用組織培養方法培育羅漢果苗,年生產羅漢果組培苗100萬株以上。引進和選育出的龍青1號、龍青2號、紅毛1號、紅毛2號、青冠、柏林2號等羅漢果優良品種和優良單株,通過組培育苗實現快速繁育,生產上得到大面積推廣應用,羅漢果種植效垂直綠化益顯著提高,在羅漢果繁育技術和栽培技術上都獲得了重大進展。現將羅漢果組培苗繁育技術介紹如下。
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1、采集繁殖材料
為獲取羅漢果優質種質資源,花園設計繁育陽臺花園羅漢果優質組培苗,有關專家和技術人員深入果園廣泛調查研究,比較篩選果園、品種,長期觀察其長勢、開花和座果情況,選擇在生長健壯、來花及時、掛果容易、果大整齊的品種和單株上采集枝條。
2、消毒處理
剪取約50cm的嫩梢,在組培室工作臺上用無菌水沖洗后浸入75%酒精溶液中消毒5s,然后浸入0.1%升汞溶液中消毒10min,取出后再用無菌水沖洗干凈。
3、莖尖脫毒培養
①配制培養基基本培養基用MS+BA1.0mg/L+IAA0.1mg/L+瓊脂0.35%+蔗糖3%,pH值調至6。把配制好的培養基進行分裝,每瓶裝約2cm高,擰緊蓋子,高壓滅菌后讓其自然冷卻備用。
②切取莖尖分生組織切取0.5~1mm的莖尖分生組織,然后接種到培養基中進行培養。
4、切段繼代培養
①配制培養基繼代培養基用MS+BA0.5mg/L+IAA0.1mg/L+IBA0.5mg/L。
②切段繼代培養當莖尖分生組織培養出的小苗長至6cm高時進行切段,每段帶一個節間約0.5cm,接種到繼代培養基上進行繼代培養。如此反復繼代5~6次,然后轉入生根培養基上誘導生根。培養室溫度為24~29℃,光照強度800~1200Lx,每天光照12h。
5、誘導生根培養
2005年開始,把在興安經4~5次繼代培養的準備用于生根培養的瓶苗運到南寧,利用南寧1~4月的氣候條件進行組培苗生根培養和大棚煉苗。
①配制培養基誘導生根培養基用MS+BA0.03mg/L+NAA0.3mg/L+0.01%活性炭。
②接種挑選已培養了20d以上、生長健壯、無污染的繼代培養的瓶苗作為生根培養的種苗,放到無菌的鉛墊板上用攝子鉗住愈傷組織,用剪刀把苗上的葉子剪掉,再按一芽一段剪斷,要求基部比頂部長,然后按照基部、莖段、頂芽分別均勻插到不同培養瓶的培養基中進行培養,每瓶接10株。
⑧生根苗的培養前期:25℃,暗培養5d,濕度85%;中期:28℃,光照1800LX,每天光照12h,濕度85%;后期:25℃,光照1500LX,每天光照12h,濕度85%。10d后均可陸續生根。
6、煉苗
當組培生根苗長出約0.5cm長,就可搬到大棚內進行練苗。初搬到大棚前2d不能讓強光直射小苗。2~3d后把瓶蓋打開,開蓋后馬上噴水保濕以防萎蔫,噴水后用濕報紙蓋上。2d后可以把報紙適當掀開,但仍然要避免強光直射,10d后即可移栽。
7、移栽
①大棚的消毒地面用生石灰粉進行消毒,大棚四壁及棚頂采用吡蟲啉、菊脂類農藥、甲基托布津三種農藥混合溶液噴灑。
②營養土裝杯用塘泥作培養基質,裝入7cm×6cm的營養杯中。然后用500倍的多菌靈溶液淋透消毒。
③洗苗將選出來的正常苗放到水里,清洗粘附在基部的培養基,把洗好的苗放到500倍的多菌靈液中浸泡5s,再用800倍生根粉液浸泡15min。
④種植用勺子把泥土挖起來后,把處理好的苗基部放進坑里再把泥土蓋回來,立即淋透水,然后蓋上薄膜成小拱棚以保溫保濕。
8、大棚育苗
①殺菌成活前要對小苗進行殺菌,每個早上揭膜噴灑多菌靈水溶液,給小苗殺菌補水,以抑制雜菌滋生。
②保溫2月份室外氣溫低,需要大棚保溫,在大棚內再搭小拱棚保溫。
③光照2月份陽光不是很強烈,但小苗受不了陽光的強烈照射,出太陽時要蓋遮陽網以防灼傷小苗。初期管理要特別細心、認真,隨時觀察天氣的變化和小苗的生長況狀,及時采取適當措施管理。
④揭膜小苗成活后便進入生長中期,溫度相對穩定的白天,可以把膜揭開讓其逐步適應大棚內環境,晚上再將膜蓋起來;而到天氣較溫暖時晚上也不需要蓋膜。
⑤施肥用多得富爾露,磷酸二氫鉀,復合肥等肥料進行追肥。
9、出棚
3月下旬,組培苗葉色濃綠、莖粗壯、高6cm以上時就可以開始出圃。用硬竹筐或塑料筐裝運。